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SARS-CoV-2病毒中和抗體檢測試劑盒(酶聯免疫法)

SARS-COV-2病毒中和抗體檢測試劑盒(酶聯免疫法), 可檢測抗SARS-CoV-2的中和性抗體,中和性抗體能阻斷病毒刺突糖蛋白受體結合區域(RBD) 與細胞表面受體血管緊張素轉換酶-2(ACE-2) 相互作用。該方法可檢測血清和血漿中能中和RBD-ACE-2相互作用的任何抗體,并且此方法不受樣本種屬和抗體亞類的限制。試劑盒可用于評價SARS-CoV-2病毒疫苗免疫效果、治療性抗體的篩選及SARS-CoV-2病毒動物感染中間宿主溯源研究。
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新冠肺炎
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產品描述

 

名稱和用途

 

 

SARS-COV-2病毒中和抗體檢測試劑盒(酶聯免疫法), 可檢測抗SARS-CoV-2的中和性抗體,中和性抗體能阻斷病毒刺突糖蛋白受體結合區域(RBD) 與細胞表面受體血管緊張素轉換酶-2(ACE-2) 相互作用。該方法可檢測血清和血漿中能中和RBD-ACE-2相互作用的任何抗體,并且此方法不受樣本種屬和抗體亞類的限制。試劑盒可用于評價SARS-CoV-2病毒疫苗免疫效果、治療性抗體的篩選及SARS-CoV-2病毒動物感染中間宿主溯源研究。

 

檢測原理

 

該試劑盒是一種阻斷性ELISA檢測工具, 它模擬了病毒的中和過程。該試劑盒包含兩個關鍵成分:辣根過氧化物酶(HRP) 標記的重組SARS-CoV-2 RBD片段(RBD-HRP) 和人類ACE- 2受體蛋白(hACE2) 。RBD-HRP和hACE-2之間的蛋白-蛋白相互作用可以通過抗SARS-CoV-2 RBD的中和抗體來阻斷。

首先, 將樣品和對照與HRP-RBD進行預孵育, 使中和抗體與HRP-RBD結合。然后將混合物加到預先包被了hACE-2蛋白的捕獲板上。未結合的HRP-RBD以及任何與非中和抗體結合的HRP-RBD將被捕獲在板上, 而中和抗體一RBD-HRP復合物留在上清中, 并在洗滌過程中被去除。洗滌步驟后, 加入TMB溶液顯色(藍色) 。然后加入終止液, 反應終止。

本試劑盒僅用于科研,不用于臨床診斷

 

實驗過程簡述

 

1.    陽性對照、陰性對照、稀釋樣品與稀釋的RBD-HRP體積比1:1混至管中,37℃孵育30min
2.    添加上述100ul的陽性對照混合物、陰性對照混合物、樣品混合物到ACE-2捕獲板對應的孔,在37℃持續孵育30min
3.    用1*洗液,每次260ul洗板4次,拍干
4.    加入100ul顯色液,37攝氏度孵育箱避光孵育15min
5.    加入50ul終止液
6.    酶標儀 450nm 630nm雙波長讀板

 

結果分析

 

 

SARS-CoV-2中和抗體檢測的陽性cutoff和陰性cutoff可用抑制率解釋。操作者可將抑制率與下表進行比較,以確定樣品的結果。每塊96孔酶標板最多可加80份血清樣本。抑制率=(樣品OD值-陰性對照OD值)÷(陽性對照OD值-陰性對照OD值)

 

 

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